放射标记、酶标记、发光标记、荧光标记和免疫金标记技术都是标记免疫分析技术的例子。
Yalow和Berson在1959年发明了放射免疫分析法(RIA),这是一种将放射性核素示踪技术与高灵敏度和特异性免疫化学技术相结合的革命性方法。
标记免疫分析方法利用核素标记物的扩增效应提高被测物质的检测下限,同时使用抗体或抗原作为结合试剂,大大提高了分析的特异性。
Conn等人在20世纪40年代开发了荧光标记免疫分析法(FIA)。抗原或抗体用荧光材料标记,与适当的抗原或抗体结合,并用荧光显微镜或紫外线照射测量荧光强度。荧光标记免疫分析法是一种利用荧光显微镜或紫外光测量荧光强度和荧光的技术。
虽然荧光标记免疫分析方法是非常敏感的,荧光素可能是生理上的危险,降低抗体或抗原的敏感性和选择性。
它是继免疫荧光抗体技术和放射免疫分析法之后的一项重要的血清学新技术。1966年,Nakane et al.和Avrameas et al.分别报道了用酶代替荧光素标记抗体,开发了酶标记抗体方法(酶标记抗体技术),用于生物组织中抗原的定位和鉴定。
Engvall Van Weemen等人于1971年发表了酶标记免疫吸附试验,第一次定量检测了酶标记抗体。
基于酶标记抗体的免疫转移技术诞生于20世纪80年代,用于检测和鉴定蛋白质分子。
免疫酶标记技术目前广泛应用于免疫诊断、检测和分子生物学研究中。
国外在20世纪80年代末开始使用化学发光化学物质标记抗原或抗体,从而发展了发光免疫分析技术。
发光免疫分析法(chemiluminescence immunoassay, LIA)是化学发光免疫分析法(chemiluminescence immunoassay, CLIA)的统称。
此外,电化学发光免疫测定法和酶扩增化学发光免疫测定法也可用(ECLIA)。
CLIA是由Sohrocler和Halman在20世纪70年代末开发的,它结合了发光的高灵敏度和免疫分析法的特异性。同酶标记法的基本原理是利用化学发光反应试剂(可为鲁米诺或催化剂等)标记抗原或抗体,标记抗原和抗体,并经一系列免疫反应、物理和化学步骤(如离心分离、洗涤等)进行检测,最后确定发光强度的测定形式。
磁免疫层析检测(MICT)是当前物理学和生物技术的结合,最初应用于基础医学领域,用于创建和构建磁检测方法[13,14]。
与其他标记技术不同的是,磁粒子标记不受有色杂质的影响,可以直接用于定量有色物质,如血液、食物和污水。前提是利用超顺磁性纳米颗粒作为标记物,通过非常灵敏的磁性探测装置来监测附着在免疫复合物上的磁性颗粒的局部磁场影响,从而产生被研究分析物的定量结果。