试剂盒中和抗体检测“金标准”

1.中和抗体快速检测试剂盒的“黄金标准”

中和抗体检测是疫苗研制和临床评价过程中的重要指标之一。中和抗体检测的实验室金标准是感染抑制试验，主要包括利用活体进行斑块减少中和试验和通过检测细胞病变变量进行分析的微量细胞中和试验。

这两种方法都是用等量定量活血清和不同稀释度的血清接种预先制备的单层细胞，通过不同指标评价细胞病理程度和中和抗体效价。使用活体体外培养的中和试验反映了人类血液样本中能够阻止感染的中和抗体的总滴度。

2.中和抗体检测试剂盒的检测方法标准化

中和性抗体检测方法需要经过严格的标准化过程和充分的性能评估，通过建立合适的Cut-off值来确定低防护水平，与防护能力建立相关性。如比较成熟的流感疫苗、EV71疫苗、狂犬病疫苗、脊髓灰质炎疫苗等，都建立了世卫组织认可的标准化中和抗体检测方法，并有相应的世卫组织标准产品和推荐标准菌株。设置一个明确的Cut-off值。对于其他疫苗，即使没有国际公认的参考方法，各疫苗生产企业也需要建立相对标准化的中和抗体的检测方法。

此外，对于新出现的严重传染病，由于活菌株来源的限制和需要在高水平的生物安全实验室进行操作，越来越多的实验室开始开发伪细胞培养方法，以检测中和抗体。该方法中的伪膜蛋白结构与活体相似，不需要高水平的生物安全实验室。操作简单，判断结果客观。但是，该方法还需要标准化，并需要用活体培养的方法进行验证。

专家普遍认为，上述PRNT、CPE和伪中和试验是疫苗评价中常用和经典的三种中和抗体检测方法。方法上可行，但需要严格的标准化过程。

为此，包括世卫组织实验室在内的国内外许多研究机构和生产企业都在研究活中和抗体或假中和抗体检测方法。但由于疫苗研制周期有限，相关基础研究仍不足。再加上突变株的不断出现，到目前为止还没有建立标准化的中和抗体检测方法;不同机构建立的测试方法之间也有很大的差异。